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去除液体生物样品(包括质粒DNA样品)中污染的内毒素(endotoxin)具有重要的临床意义，因为内毒素对原代细胞、传代细胞和整体动物均具有显著的毒性作用。由于内毒素(化学本质为脂多糖，即lipopolysaccharides)是包括E.coli在内的革兰氏阴性细菌细胞壁的主要组成成分，并且带电性跟DNA类似，所以从E.coli细胞中提取的质粒DNA和重组蛋白质药物中常常含有大量的内毒素污染，并且很难用用常规方法(包括硅胶膜吸附，离子交换吸附、凝胶排阻过滤、氯化铯超速离心)去除。本制品就是专门用于高效去除生物样品中的内毒素污染。

• 简单快速，一次处理只需要20分钟左右，不需要复杂仪器设备。
  
• 高效，一次处理可以去除90%以上的内毒素，经过三次重复抽提可将内毒素的水平降低到0.2 EU/ml以下。
  
• 适用范围广，可用于DNA、RNA、蛋白质或其他生物样品。
  
• 不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性，处理过的质粒DNA可用于转染实验。
  
• 既可小规模使用(在1.5mL离心管内)，也可放量使用。

• 用于体积小于500μL的DNA/RNA样品
  
  • 在一干净的离心管中加入500μL的样品。如果不足500μL，可以用水或TE补足。
    
  • 加入50μL的3M醋酸钠(pH5.2)，混匀后冰浴5分钟。
    
  • 加入50μL预冷的本制品，充分混匀后冰浴10分钟。
    
  • 65℃水浴直到溶液变浊或出现分层为止(一般需要1～5分钟)。
    
  • 室温12000～15000×g离心2分钟(不能低温离心)，离心后上层为无色透明，下层为淡蓝色。
    
  • 将上清转移到新的离心管中。
    
  • 如果需要，可以重复步骤c～f。
    
  • 加1倍体积的异丙醇或两倍体积的乙醇，混匀，15000×g离心30分钟。
    
  • 弃上清后用70%酒精洗2次。
    
  • 空气干燥沉淀后加入100μL无内毒素的水或TE缓冲液溶解沉淀。
    
  • 测定DNA和内毒素的含量，与未纯化的样品比较。
• 用于体积大于500μL的DNA/RNA样品整个操作同上，只是在15或50mL塑料离心管中进行，离心速度不能超过离心管的承受力。
  
• 整合到碱变性法质粒DNA制备过程中整个操作同上，只是：
  
  • 样品必须是加溶液III离心后得到的上清液。
    
  • 可以略去第b步操作。
    
  • 第f步以后可以重复步骤c～f几次，也可以直接用试剂盒提供的或自备的上柱液调整盐离子浓度，然后上柱，以后的操作按试剂盒提供的操作手册进行。与柱吸附相关溶液都必须无内毒素污染。
• 对蛋白质和其它生物样品整个操作同上，只是：
  
  • 略去第b步操作，加3M醋酸钠(pH5.2)只为沉淀核酸。
    
  • 第d步改为37℃保温以免蛋白质变性，溶液呈混浊状或分相一般需要20～30分钟。
    
  • 略去第h步和以后操作。

• 为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素?
  因为内毒素带电性跟DNA和部分蛋白质相同，所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附，离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子(类似于细胞膜的磷脂分子)，能够形成大小不等的聚合物，跟质粒DNA和蛋白质大小接近，所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和氯化铯超速离心)也不能将其有效分离。